Rafforzare una SARS

Rapporti scientifici volume 13, numero articolo: 4690 (2023) Citare questo articolo

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I test antigenici a flusso laterale sono stati ampiamente utilizzati nella pandemia di Covid-19, consentendo risultati dei test diagnostici più rapidi e prevenendo un’ulteriore diffusione virale attraverso l’isolamento degli individui infetti. L'esecuzione di questo screening deve essere eseguita con test che mostrino una sensibilità soddisfacente al fine di rilevare con successo la proteina bersaglio ed evitare falsi negativi. Lo scopo di questo studio era quello di creare un test a flusso laterale in grado di rilevare la proteina nucleocapside SARS-CoV-2 in basse concentrazioni paragonabili ai limiti di rilevamento dichiarati dai test esistenti sul mercato. Per fare ciò sono stati necessari diversi aggiustamenti durante la ricerca e lo sviluppo dei prototipi finché non fossero coerenti con questi criteri. Le alternative proposte, ovvero l'aumento della concentrazione anticorpale della linea di test e l'aggiunta di un'intermembrana tra il tampone del coniugato e la membrana di nitrocellulosa, sono state in grado di aumentare la sensibilità di quattro volte e generare un nuovo prototipo di test rapido chiamato "test immunologico intermembrana a flusso laterale" (LFIIT) . Questo prototipo ha mostrato un limite di rilevamento adeguato (2,0 ng mL−1) pur mantenendo convenienza e semplicità nei processi di produzione.

Nel dicembre 2019, diversi pazienti sono stati ricoverati in ospedale nella città di Wuhan, nella provincia di Hubei, in Cina, con sintomi respiratori simili alla polmonite di eziologia sconosciuta, con studi successivi che hanno mostrato prove convincenti che il mercato dei prodotti ittici e della fauna selvatica di Huanan a Wuhan potrebbe essere correlato all'epidemia. L’agente eziologico è stato identificato come un betacoronavirus del sottogenere sarbecovirus, appartenente alla sottofamiglia Orthocoronavirinae, ed è stato inizialmente denominato 2019-nCoV, che in seguito sarebbe stato ribattezzato SARS-CoV-21.

I coronavirus sono virus a RNA con senso positivo a singolo filamento che colpiscono principalmente il tratto respiratorio, ma sono anche in grado di causare effetti neurologici, enterici ed epatici2,3. Fino a dicembre 2019, sei coronavirus erano noti per infettare l’uomo, quattro dei quali causavano lievi sintomi simil-influenzali, mentre gli altri due erano responsabili di epidemie altamente patogene: SARS-CoV e MERS-CoV4,5,6. Allo stesso modo, nel marzo 2020, l’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) ha dichiarato la nuova malattia da coronavirus (COVID-19) una pandemia globale, causata dal SARS-CoV-27,8.

SARS-CoV-2 condivide il 79,5% di somiglianza genetica con SARS-CoV e l’assemblaggio delle particelle virali dipende da quattro proteine ​​strutturali principali: proteine ​​di membrana (M), nucleocapside (N), involucro (E) e proteine ​​di punta (S), oltre a proteine ​​non strutturali e accessorie9,10. Il principale metodo di infezione della SARS-CoV-2 si basa sulla glicoproteina Spike, che mostra una struttura trimerica sulla superficie del virus. È composto da due subunità: S1 e S2, poiché S1 ha un dominio di legame del recettore (RBD) ed è responsabile del legame con l'enzima di conversione dell'angiotensina 2 (ACE2), il principale recettore per SARS-CoV-2 nelle cellule ospiti11. Per questo motivo, la proteina Spike è stata presa di mira con grande attenzione per la ricerca e lo sviluppo di farmaci terapeutici e vaccini per COVID-1912. Tuttavia, la proteina Spike è anche la proteina strutturale più colpita dalle mutazioni genetiche su diverse varianti di SARS-CoV-2, che portano a importanti cambiamenti nel riconoscimento degli anticorpi, influenzando test diagnostici e vaccini13. Studi simili hanno dimostrato che la proteina N è molto più conservata tra le varianti e che le sue mutazioni non influenzano finora il legame degli anticorpi nei test diagnostici rapidi, rendendola un bersaglio migliore per i test rapidi dell’antigene SARS-CoV-214.

I test rapidi offrono numerosi vantaggi rispetto ai tradizionali metodi di laboratorio che richiedono personale addestrato e attrezzature e tempi più lunghi per ottenere i risultati15. Inoltre, il test antigenico tende a correlarsi bene con lo stato di contagiosità del paziente, rivelandosi un potente strumento per isolare gli infetti e ridurre la diffusione virale, se paragonato ai metodi molecolari16.